蛋白層析柱工作中，要進(jìn)行幾個(gè)步驟呢

　　蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎，也是生物體內的功能性大分子。隨著(zhù)分子生物學(xué)、結構生物學(xué)、生物制藥行業(yè)等研究的不斷深入，蛋白質(zhì)純化成為近年來(lái)越來(lái)越熱的研究話(huà)題。

　　蛋白的純化大致分為粗分離階段和精細純化階段兩個(gè)階段。粗分離階段主要將目的蛋白和其他細胞成分如RNA、DNA等分開(kāi)，常用的方法為硫酸銨沉淀法。精細純化階段的目的是把目的蛋白與其他大小及理化性質(zhì)接近的蛋白區分開(kāi)來(lái)，常用的方法有：凝膠過(guò)濾層析、離子交換層析、疏水層析、親和層析等。

　　蛋白層析柱的特點(diǎn)：

　　1：耐壓高，透明

　　2：快速鎖定的適配器確保均一的流速和小的死體積

　　3：特定的裝柱器保證好的柱效

　　4：材質(zhì)有很好的化學(xué)耐受性

　　5：熱穩定的夾套可維持一定的操作溫度

　　蛋白層析柱的工作流程：

　　1.預處理：在吸附樹(shù)脂的生產(chǎn)過(guò)程中，一般采用的是工業(yè)級原料，產(chǎn)品沒(méi)有經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化處理，樹(shù)脂內部殘留少量單體，所以在使用之前，需用水溶性溶劑對其浸泡處理，然后用去離子水通過(guò)樹(shù)脂層，置換出水溶性溶劑離子方可投入使用。

　　2.逆流洗柱：用水洗出去水離子及破碎填料，樹(shù)脂裝入后，用蒸餾水反洗樹(shù)脂層，直至出水清晰、無(wú)氣味、無(wú)細碎樹(shù)脂為止。再依次用酸堿等浸泡、沖洗樹(shù)脂層，至出水呈中性為止。

　　3.水洗：水洗的主要目的是除去層析柱上所附著(zhù)的渣滓。

　　4.吸附：吸附操作自上而下(或自下而上)通液，可采用不同流速，以選取條件。流出液每隔一段時(shí)間取樣檢測，達泄漏點(diǎn)停止吸附，或多柱串聯(lián)達飽和后解吸。吸附主要是吸取料液中的渣滓或要回收物，該過(guò)程應控制料液的速度及吸附量，大孔樹(shù)脂應*浸泡在料液里，以提高吸附效果和運行穩定性。

　　5.解吸、再生：解吸操作自上而下(或自下而上)通解吸劑，單柱吸附時(shí)，解吸與吸附操作對流為佳。解吸劑沸點(diǎn)要低以便回收處理。