二維制備液相

制備液相的目的是對產(chǎn)品的單體進(jìn)行提取和純化。與傳統的純化方法（如蒸餾、萃?。┍容^，它是一種更有效的分離方法，因此被廣泛應用在樣品和產(chǎn)品的提取和純化上。隨著(zhù)合成、植化、生化和制藥等領(lǐng)域對高純度組份的需求不斷增加，制備型液相色譜儀應用的領(lǐng)域也在迅速的擴大發(fā)展。  

制備液相色譜儀的使用步驟  

一、開(kāi)機  

1、接通電腦和儀器電源(接通電源之前可先把吸頭拿到要使用的流動(dòng)相瓶中)；  

2、開(kāi)儀器電源開(kāi)關(guān)，一般先上后下，下為檢測器開(kāi)關(guān)；  

3、檢查流動(dòng)相是否夠，儀器上記錄的溶劑量時(shí)候正確；  

4、開(kāi)電腦；  

5、打開(kāi)儀器聯(lián)機軟件進(jìn)入界面，點(diǎn)擊啟動(dòng)設置泵流速為10，此時(shí)儀器中應該有液體流出；  

6、點(diǎn)擊平衡然后點(diǎn)擊每個(gè)波長(cháng)和調整；  

沖一段時(shí)間，待壓力穩定后可以進(jìn)樣。  

二、進(jìn)樣  

1、將進(jìn)樣器扭到load朝上，吸取一定量待分離液，  

快速注入，做過(guò)的是吸取0.2毫升；  

2、點(diǎn)擊控制界面菜單欄中“運行控制"按鈕—樣品信息—設置信息存儲路徑(每次都要做)；  

3、扭動(dòng)進(jìn)樣器，使處于inload狀態(tài)，保留時(shí)間開(kāi)始計時(shí)；  

4、接峰；  

5、所有峰出來(lái)后，點(diǎn)擊菜單欄中的中斷—中斷，準備重復進(jìn)樣。  

三、關(guān)機  

1、點(diǎn)擊中斷后沖幾分鐘，將流速設為0，待壓力為0后將吸頭轉移到甲醇中，并把流速設為10；  

2、沖到已經(jīng)沒(méi)有東西被沖下為止，一般需要半個(gè)小時(shí)。一般此時(shí)壓力早已穩定；  

3、將流速設為0，點(diǎn)擊界面上的關(guān)閉(在啟動(dòng)旁邊)；  

4、關(guān)閉窗口，彈出的窗口都點(diǎn)肯定的，如確定是等。  

日常簡(jiǎn)易保養及維護  

1、流動(dòng)相的抽濾要求：色譜純試劑，二次蒸餾水，緩沖鹽一定要過(guò)濾。  

2、制備型液相色譜儀吸濾頭：特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞；亦可用注射器吸取流動(dòng)相通過(guò)吸濾頭打出以判斷其是否堵塞。若有堵塞情況可用異丙醇超聲波清洗；清洗不成功則需要更換。  

3、單向閥：如遇到泵壓不穩或流動(dòng)相不能抽取，則可能是單向閥出現問(wèn)題，卸下用異丙醇超聲波清洗，清洗時(shí)須按其安裝的反相放置在小燒杯中，切記不可與安裝方向倒置超洗！  

4、泵頭：泵頭漏液或出現其它故障一般要申請維修（如漏液，或更換柱塞桿及其密封墊等）。  

5、過(guò)濾片：當色譜峰出現異常情況時(shí)，有可能是此部件被污染，拆下用異丙醇超洗或更換制備型液相色譜儀過(guò)濾墊片  

6、排液閥：此處不能*密封或漏液時(shí)一般是其中的墊片污染或磨損，可卸下后取出其墊片用異丙醇超聲波清洗或更換墊圈。  

7、手動(dòng)進(jìn)樣器：平時(shí)應注意用二次蒸餾水和甲醇在裝載狀態(tài)及進(jìn)樣分析狀態(tài)清洗；如出現漏液現象，原因極可能為轉子密封墊磨損或污染，一般須申請維修或更換制備型液相色譜儀配件。  

8、制備型液相色譜儀流通池：在色譜峰不正常時(shí)可能是此部件被污染可拆卸后取出其中的墊片用異丙醇超洗（可根據說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作或申請維修）。  

9、工作站：出現死機可重啟計算機；不正常運行時(shí)，首先可更換電腦測試其硬件故障；或在本機上重新插撥接口、重新安裝軟件。  

進(jìn)行分析時(shí)保留時(shí)間有時(shí)發(fā)生漂移，有時(shí)發(fā)生快速變化，有以下幾點(diǎn)原因：  

1、溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定。  

2、流動(dòng)相發(fā)生變化，解決辦法是防止流動(dòng)相發(fā)生蒸發(fā)、反應等。  

3、柱子未平衡好，需對柱子進(jìn)行更長(cháng)時(shí)間的平衡。  

4、流速發(fā)生變化，解決辦法是重新設定流速，使之保持穩定。  

5、泵中有氣泡，可通過(guò)排氣等操作將氣泡趕出。  

6、流動(dòng)相不合適，解決辦法為改換流動(dòng)相或使流動(dòng)相在控制室內進(jìn)行適當混合。  

制備液相色譜主要用于以下領(lǐng)域：  

1.天然藥物化學(xué)、中藥化學(xué)。這是國內目前廣泛的使用方法，為了弄清楚植物中的微量有效成分，開(kāi)放手工色譜柱早已不夠用了，幾乎每個(gè)搞天然藥化的實(shí)驗室都至少有一臺液相，土豪實(shí)驗室人手一臺液相。  

2.蛋白純化。相對于前者，蛋白純化的起步要稍微晚一點(diǎn)，但是發(fā)展很迅速。同時(shí)，由于外國儀器廠(chǎng)家在這個(gè)領(lǐng)域的優(yōu)勢不算太大，目前國內也在這個(gè)領(lǐng)域加快發(fā)展，搶占地盤(pán)。  

3.藥物雜質(zhì)純化。由于合成工藝并不能做到100%的產(chǎn)率，往往伴有副產(chǎn)品，如何獲得微量的雜質(zhì)并確定結構和含量，這就得靠液相色譜。  

4.手性化合物的制備。這個(gè)主要是有機合成和方法學(xué)的在用。